苦瓜提取物检测方法—保健食品总皂甙测定法

苦瓜提取物常规成分为苦瓜素、苦瓜甙,一般用干燥苦瓜切片干燥后弱醇提取,浓缩干燥后粉碎为80目精细粉末,常用于保健食品中辅助降血糖原料,目前市场上苦瓜提取物种类繁多,检测方法各不相同,下面为同行提供一种保健食品中常用的苦瓜提取物检测方法;

苦瓜提取物检测方法-西安品诚生物

物检测方法(保健食品总皂苷测定法)

B.1 试剂 
B.1.1 Amberlite-XAD-2 大孔树脂,Sigma 化学公司、U.S.A B.1.2 正丁醇 分析纯。
B.1.3 乙 醇 分析纯。
B.1.4 中性氧化铝 层析用,100-200目。
B.1.5 高氯酸 分析纯。 B.1.6 冰乙酸 分析纯。
B.1.7 香草醛溶液 称取5g香草醛,加冰乙酸溶解并定容至100mL。
B.1.8 人参皂甙Re 购自中国药品生物制品检定所。
B.1.9 人参皂甙Re标准溶液:精确称取人参皂甙Re标准品0.020g,用甲醇溶解并定容至10. 0mL,即每毫升人参皂甙Re2.0mg。

B.2 仪器
B.2.1 比色剂
B.2.2 层析柱

B.3 实验步骤
B.3.1 试样处理
B.3.1.1 固体试样:称取1.000g左右的试样(根据试样含人参量定),置于100mL容量瓶中,加少量水,超声30min,再用水定容至100mL,摇匀,放置,吸取上清液1.0mL进行柱层析。
B.3.1.2 液体试样:含乙醇的补酒类保健食品,吸取1.0mL试样(假如浓度高、或颜色深,需稀释一定体积后再取1.0mL)进行柱层析。

B.3.2 柱层析:用10mL注射器做层析管,内装3cm Amberlite-XAD-2 大孔树脂,上加1cm中性氧化铝。先用25mL70%乙醇洗柱,弃去洗脱液,再用25mL水洗柱,弃去洗脱液,精确加入1.0mL已处理好的试样溶液(见B.3.1),用25mL水洗柱,弃去洗脱液,用25mL70%乙醇洗脱人参皂甙,收集洗脱液于蒸发皿中,置于60℃水浴挥干。以此作显色用。
B.3.3 显色:在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL5%香草醛冰乙酸溶液,转动蒸发皿,使残渣都溶解,再加0.8mL高氯酸,均匀后移入5mL带塞刻度离心管中,60℃水浴加热10min,取出,冰浴冷却后,准确加入冰乙酸5.0mL,摇匀后,以1cm比色池与560nm波长处与标准管一起进行比色测定。 B.3.4 标准管:吸取人参皂甙Re标准溶液(2.0mg/mL)100μl放蒸发皿中,放在水浴挥干(低于60℃),或热风吹干(勿使过热),以下操作从“B.3.2柱层析?”起,与试样相同。测定吸光度值。

计算:

总皂甙测定公式
式中:
X:试样中总皂甙量(以人参皂甙Re计),g/100g;
A1:被测液的吸光度值;
A2:标准液的吸光度值;
C:标准管人参皂甙Re的量,μg
V:试样稀释体积,mL
m:试样质量,g 计算结果保留二位有效数字。